用有关基因全为隐性纯合体的个体（即测验系统的个体）与F₁进行的杂交。尽管作法上似与回交相同，即回交是用亲本之一与F₁间的杂交，相反，而测交则是对基因组成的推断是否正确的一种检验形式，它是在明确目的要求下使用隐性纯合体进行的杂交，所以试验的意义是不同的。在两因子杂种（dihy-brid）时，2组基因是连锁，还是独立的，从F₂的分离比可以估算，但为了进一步验证，所以要进行测交试验。因为从隐性纯合个体与F₁杂交产生后代的表现型能反映出F₁配子的基因型的种类及其比率。