杂醇油在人体内分解缓慢，比乙醇具有更大的毒作用。白酒中杂醇油的成分复杂，准确分析比较困难，常用对二甲氨基苯甲醛比色法测定，下面对此法进行技术探讨。

一、原理

高级醇（丙醇除外）经硫酸脱水后，转为不饱和烃，与对二甲氨基苯甲醛发生缩合反应，生成橙红色化合物，根据颜色深度测定杂醇油含量。

二、操作过程

吸酒样1ml于10ml容量瓶中，加水至刻度摇匀，在10ml比色管中按表1加入各溶液。

各管摇匀放冰水溶中，沿管壁各加对二甲氨基苯甲醛硫酸溶液2 ml，使硫酸溶液至管底，再将各管同时摇匀，放入沸水浴中加热15分钟后取出，立即放入冰水浴中冷却并各加蒸馏水2 ml，混匀，10分钟后在波长520nm处测杂醇油含量。

三、计算

杂醇油（g/L）=A/0.3

式中：A-样品管测得杂醇油示值(mg)

四、技术探讨

1、 该显示反应的先决条件是高级醇脱水生成烯烃，由于反应中间体碳正离子的稳定性是：三级>二级>一级>，因而高级醇脱水反应的活性顺序为：三级醇>二级醇>一级醇。由于空间结构影响，碳原子数越多，空间结构越复杂的醇反应越困难。综合上述两方面因素，高级醇显色灵敏度为：异丁醇>异戊醇>正戊醇>其他高级醇。丙醇在此条件下不发生反应，不会显色；正丁醇反应比较困难，也没包括在分析的杂醇油示值之内。

2、 该显色反应不是高级醇的特效反应，凡试样中能脱水成不饱和烃的化合物，如醛、缩醛、酮和萜等都将干扰测定。醛类含量过高的试样，可用盐酸间苯二胺处理，消除干扰，方法如下：吸取50 ml试样加0.25g盐酸间苯二胺煮沸，回流1小时，蒸馏试样，收集馏出液50 ml。

3、 在温度较高时，乙醇也与硫酸作用发生同样显色反应，而加入硫酸溶液时会产生大量热，操作时，可先将比色管放在冰水浴中冷却2-3分钟后理缓慢加进对二甲氨基苯甲醛硫酸溶液。

4、 对二甲氨基苯甲醛硫酸溶液加入比色管后，比色管温度会升高，升高的幅度对分析结果有影响，实验证明，瞬间温度达到10℃以上正丁醇参加脱水反应；40℃以上丙醇参与反应；100℃以上乙醇参与反应，所以温升得越高，测得的结果就越要偏大。

5、 各种酒中高级醇的组成和比例有很大差别，杂醇油标准溶液的组成和比例与被测样品的高级醇组成越接近，分析结果就越准确。操作时，可以通过气相色谱分析异丁醇和异戊醇的比例，以此为依据配制标准液。

6、 对二甲氨基苯甲醛与高级醇反应不符合化学计量，通过显色与比色，测得的实际上是不饱和键的数量，再以标准管的杂醇油组成形式计算酒中杂醇油的含量。

7、 该显示反应与样品乙醇浓度有关，在操作时要确保标准管与样品管的乙醇浓度相同。