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高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。但是作为一个相对复杂的仪器，在使用过程中你是不是遇到了关于HPLC的各种恼人的问题？以下内容或许能帮到您。01 压力异常（一）无压力显示、无流动相流动
1. 泵未启动
解决方法：
①设置适合的泵流量
②溶剂管理器中设置充足的溶剂余量。
2. 工作站未正常连接
仪器指示灯常亮
（1）网线/USB线异常
解决方法：更换网线/USB线
（2）工作站端口未设置
解决方法：设置工作站端口
（3）电脑IP与工作站IP冲突
解决方法：修改电脑IP
仪器状态灯闪烁
（1）CAN线连接异常
解决方法：重新拔插一下CAN线
（2）通讯板灯异常
解决方法：更换通讯板
3. 柱塞杆折断
解决方法：更换柱塞杆
4. 泵头内有空气
解决方法：
①溶剂脱气
②打开旁路放空阀5mL/min高流量放空。
5. 流动相不足
解决方法：补充流动相
6. 过滤沉子堵塞
解决方法：更换过滤沉子
7. 单向阀损坏
解决方法：更换单向阀
8. 漏液
解决方法：拧紧或更换相应漏液部件。
（二）流动相流动正常但没有压力显示
旁路放空阀组件损坏
解决方法：更换旁路放空阀组件
（三）压力持续偏高/不断升高
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解决方法：清洗或更换保护柱
2. 流速设定过高
解决方法：调整流速设定
3. 柱前筛板堵塞
解决方法：
①在允许情况下反冲色谱柱
②更换筛板
③更换色谱柱
4. 流动相使用不当或缓冲盐结晶沉淀
解决方法：
①使用恰当的流动相
②冲洗色谱柱
5. 色谱柱选择不当
解决方法：选择恰当的色谱柱
6. 进样阀损坏
解决方法：清洗或更换进样阀
7. 柱温过低
解决方法：提高柱温
8. 工作站失常
解决方法：
①工作站问题。更换工作站
②电脑版本和工作站冲突。更换推荐配置的电脑。
9. 在线过滤器阻塞
解决方法：清洗或更换在线过滤器
（四）压力持续偏低/不断下降
1. 系统漏液
解决方法：确定漏液位置并维修
2. 流速设定过低
解决方法：调整流速
3. 色谱柱选择不当
解决方法：选择适合的色谱柱
4. 柱温过高
解决方法：降低温度
5. 控制器失常
解决方法：维修或更换控制器
6. 工作站失常
解决方法：
①更换工作站
②电脑版本与工作站冲突，更换推荐配置的电脑
（五）压力波动
1. 泵中有气体
解决方法
①溶剂脱气
②除去泵中气体
2. 单向阀损坏
解决方法：更换单向阀
3. 泵密封损坏
解决方法：更换密封圈
4. 脱气不充分
解决方法：
①溶剂脱气
②改变脱气方法（使用在线脱气法等）
5. 系统漏液
解决方法:确定漏液位置并维修
6. 使用梯度洗脱，由于流动相粘度的变化引起的压力波动。02漏液
（一）接头处漏液
1. 接头问题
解决方法：
①接头的松紧应适当，不宜过松或者过紧。
②接头污染应拆下清洗或者更换
2. 接头处连接管未正常连接
解决方法：
①拧松接头，先将连接管固定或压到底，再拧紧接头
②韧环或连接管发生不可恢复的变形引起的漏液，更换韧环或连接管路。
3. 部件不匹配
解决方法：使用同一品牌的配件
（二）泵漏液
1. 单向阀松动
解决方法：
①拧紧单向阀（不必拧的过紧）
②更换单向阀
2. 接头松动
解决方法：将接头拧到合适的程度。
3. 泵密封损坏
解决方法：维修更换密封圈。
4. 旁路放空阀组件损坏
解决方法：
①拧紧旁路放空阀
②维修或更换旁路放空阀
5. 比例阀损坏
解决方法：
①检查隔膜，如果漏液立即更换
②更换垫片
（三）检测器漏液
1. 流通池垫片损坏
解决方法：
①避免过大的背景压力（压力降低）
②更换垫片
2. 流通池破碎
解决方法：更换窗口
3. 手紧接头漏液
解决方法：拧紧或更换
4. 废液管堵塞
解决方法：更换废液管
5. 流通池堵塞
解决方法：重新安装或更换当仪器的CAN线都已经正常连接，且仪器处于打开状态，通讯板上的指示灯处于闪烁的状态。若通讯板上的指示灯不亮或常亮，为通讯板异常。通讯板的指示灯不亮，可能是通讯板未接通电源。检查仪器是否开机，CAN线是否有松动情况。若通讯板常亮，为通讯板异常，更换通讯板。
若输液泵中存在大量的气泡或新仪器安装时，使流动相充满溶剂瓶到输液泵的管路，并检查泵上各个接头处，确保仪器未漏液。然后将旁路放空阀上接到进样器的管路卸下，用堵头堵住。打开旁路放空阀，5mL/min的流量冲洗并隔个1分钟左右，将旁路防空阀旋紧2～3s观察工作站中的压力显示，压力不得超过25MPa，然后迅速旋松，不断循环此操作5分钟。将旁路放空阀到进样器的管路连接好，观察输液泵是否正常吸液或压力波动是否好转，若现象有好转，但仍然压力波动较大，则重复此操作至压力平稳。
