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石蜡切片法

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-08-22
显微技术切片方法之一。制法步骤较繁杂,但仍是一适用的传统方法。①固定:取适当大小的新鲜材料如根、茎等,于指管固定液中12-24小时;干燥材料用水浸泡复原,或浸于50%甘油中软化后使用,不须固定或固定。②冲洗:材料反复用常水,最后用蒸馏水彻底冲洗干净,尤其是用铬酸固定的材料,必须将铬酸洗净,否则影响染色。③脱水:材料经10%-100%酒精,逐步脱净水分。一般每步经五1-2小时,愈往上时间愈长,至100%酒精,重复换1次,以保证完全脱水。④透化:用25%、50%、70%、90%二甲苯一无水酒精透化(如材料脱水不净,进入此步,将出现浑浊),每隔2-3小时更换1次,至纯二甲苯,重复换1次,使酒精完全脱除。⑤浸蜡:将指管(连同材料及二甲苯)放入60℃温箱中,取熔点52-56℃的纯净石蜡小块片(或熔融的石蜡)逐步加入指管中,使熔蜡达到饱和,并让二甲苯徐徐挥散,换蜡3-4次,至口尝无异味,如同嚼蜡为止。⑥包埋:将熔蜡及材料趁热倒入预制小纸盒中,调整材料位置,使之疏散均匀,让蜡渐渐冷凝,移浮于水面,至完全凝固。⑦切片:剥离纸盒,切取材料蜡块,于旋转切片机上切成连续蜡带8-15μm厚。⑧粘片:被片上涂一薄层粘贴剂,加1滴水,切取蜡带材料,烫手,烘干。⑨脱蜡:玻片置二甲苯中脱蜡(或不脱蜡)。⑩染色:可在水溶液或酒精液中染色(或二重染色)。复经脱水、透化等步骤,最后封藏,标记。
 
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