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中性粒细胞碱性磷酸酶活性组织化学检查法

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-06-27
1 试剂
  a.固定液:加甲醛10ml于无水甲醇90ml中。
  b.缓冲底质液(须临用时配制):由10%巴比妥钠30ml、3.2%β-甘油磷酸钠30ml、M/10硫酸镁30ml、2%硝酸钙45ml及蒸馏水165ml配成。
  c.清洗液:在蒸馏水中加几滴2%硝酸钙液。
  d.2%硝酸钴。
  e.稀硫化铵液:硫化铵1ml加水至80ml。
  f.2%碱性藏红水溶液。
2 方法
  a.指端取血推片,不宜太薄。
  b.迅速将血片置固定液中固定30秒,然后用清洗液洗数秒钟。
  c.将已固定的血片放于缓冲底质液内,在37℃水浴中保温2小时,然后用清洗液洗数秒钟。
  d.将上述血片依次放入2%硝酸钴液中5分钟,用清洗液洗净,然后移于稀硫化铵液中1分钟,用清洗液洗净,最后用2%碱性藏红水溶液染色16秒,用水洗净,待干,用显微镜油镜观察结果。
3 计算方法
  共计数100个中性粒细胞,视其细胞内碱性磷酸酶活力强弱,按Kaplow法五级记分表示。将每级阳性细胞百分比乘以各该级的分数所得分数之和,即为碱性磷酸酶的积分。分级的标准如下:
  a.中性粒细胞胞浆无异常着色或颗粒,为0分。
  b.胞浆内呈弥散的浅棕色,或少许细微颗粒,为1分。
  c.胞浆内有棕色散在颗粒,为2分。
  d.胞浆内有分布不均匀的棕黑色颗粒,为3分。
  e.胞浆内充满了均匀一致的棕黑色颗粒,或块状沉淀,为4分。
 
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