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一、温度调节
培养基倾注的适宜温度大约为45℃-50℃�？梢杂檬中暮褪直车母芯趵创笾屡卸衔露龋中母芯醪惶蹋直掣芯跆淌质�，温度大概就是50℃左右。温度过高会导致凝固时间延长，且皿盖上会有大量冷凝水，不利于后续实验；温度过低则可能导致倒板过程中瓶中培养基部分凝固。
二、静置时间
培养基灭菌后应放置在水浴或烘箱中保温，使用前拿出直接倒板。培养基的静置时间不宜过长，一般不超过4小时，以避免琼脂少量凝固。
三、平板准备
倒皿前，平皿应预热保持在35℃-40℃的温度。如果需要表面接种，有冷凝水的平板表面容易产生蔓延菌落。这时可放在有对流的无菌净化台中吹干培养基表面，但不能过度干燥，否则培养过程中平板容易开裂。
四、倾注量与混合
平板倾注量一般在18-20mL左右。如果培养时间超过48小时或培养温度高于40℃，为防止水分过量蒸发导致平板开裂，倾注量一般为25mL左右。倾注时尽量贴着平皿壁缓慢倒入，将气泡留在瓶子底部。如果平板中有少量气泡，可以把气泡轻摇到平板壁上，这样不会影响结果观察。另外，每个平板中加入融化后的琼脂培养基时，要迅速往复摇动和转圈晃动5-15次，使培养基与接种物充分混合。
五、避免污染
在整个操作过程中，需要注意避免污染。使用前需将装有培养基的瓶子或试管弄松，然后放在滚水或蒸汽浴里进行溶解，要小心避免培养基过热变质。已消毒培养皿的数量要比所测样品的数量多一个，用作空白对照
六、培养
待平板冷却后翻转并置于适当的温度下培养。倒平板后，可以打开皿盖，让其在超净台中凝固5分钟后再关闭皿盖，倒置放置备用；也可以采用一个接一个地倒置培养皿的方式，直到全部凝固后再倒置备用，这样可以有效地减少皿盖上的水蒸气产生。
