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组成成分
营养物质
不同的细菌对营养的要求不同，但细菌需要的营养物质应含有氨源、碳源、无机盐类和生长因子等。
1、蛋白：最常用的成分之一， 提供细菌生长繁殖所需要的氮源，含胨、多肽和多种氨基酸，为大多数细菌生长所利用。易溶于水遇酸不沉淀，不因受高温而凝固，为两性电解质有缓冲作用。
2、肉浸液：用新鲜牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。含有可溶性含氮浸出物和非含氨漫出物，还有一些生长因子。可为细菌提供氨源和碳源，但所含氮物质过少不能满足细菌的需要，因此在制备培养基应加入1%~ 2%的蛋白胨和0.5%氯化钠。
3、牛肉膏：由肉浸液经长时间加热浓缩而制成。糖类在加热过程中被破坏，其营养价值低于肉浸液，可用作肠道杆菌鉴别培养基的基础成分。
4、糖类、醇类：为细菌生长提供碳源和能源。制备培养基所用的糖类、醇类有多种，常用的糖类有单糖、双糖和多糖；常用的醇类有甘露醇、卫茅醇等。葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源的基本成分，其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做的发酵反应。
5、血液：血液中含有多种营养物质，又能提供辅酶、血红素等特殊生长因子，用于培养营养要求较高的细菌。还可根据细菌在血液培养基中的溶血现象而进行鉴定。
6、无机盐类：提供细菌生长的各种元素，如钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫等。最常用的有氯化钠和磷酸盐，前者维持酶的活性、调节菌体内外的渗透压，后者是细菌良好的磷源，并具有缓冲作用。
7、鸡蛋和动物血清：不是基本成分，是某些细菌生长所必需的营养物质，仅用于制备特殊的培养基。如培养结核分枝杆菌的鸡蛋培养基和培养白喉杆菌的吕氏血清培养基等。
8、生长因子：为细菌生长所必需的，需要量很小。常在肝浸液、肉浸液、醇母浸液和含血液培养基中加入维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生长因子。
凝固物质
制备固体培养基时，需在液体中加入凝固物质。常用凝固物质为琼脂，某些情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。琼脂是从石花菜中提取出来的一种半乳糖胶，温度在98℃以上时可溶于水，在45℃以下可凝固成凝胶状态，不被细菌分解利用，无营养作用。
抑制剂和指示剂
制备培养基时常加入抑制剂和指示剂，不是细菌生长繁殖所必需的物质，而是选择、鉴定及判断结果的需要。
1、抑制剂：具有选择抑制作用，在制备培养基 时加入定种类的抑制剂， 可抑制非检出菌（非病原菌）的生长，利于检出菌（病原菌）的生长，常用有胆盐，煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及-些染料和某些抗生素等。
2、指示剂：在培养基中加入一定种类的指示剂， 观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有粉红、甲基红、中性红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝和中国蓝等酸碱指示剂。亚甲蓝常用作氧化还原指示剂。
种类
1、基础培养基：含有细菌基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要含生肉浸液和蛋白胨，用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。
2、营养培养基：基础培养基中加入血液、 葡萄糖、生长因子等特殊成分，供营养要求高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长，最常用的是血琼脂平板和巧克力血平板等。
3、鉴别培养基：在某些培养基中加入一些特定物质， 如糖、苷、醇类、氨基酸、蛋白质等和指示剂，测定细菌的生化反应，以鉴别和鉴定细菌用的培养基。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU) 培养基等。
4、选择培养基：在培养基中加入抑制剂，抑制标本中杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。如培养肠道致病菌的沙门-志贺琼脂。
5、特殊培养基：某些细菌在生长繁殖时需要特殊的条件才能够生长，包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基，后者是针对细胞壁缺损的细菌L型。
分离培养基的选择
1、血平板：适合各类细菌的生长，一般细菌检验标本的分离，都应接种此平板。
2、巧克力血平板：含有V和X因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等的标本。
3、中国蓝平板或伊红亚甲蓝平板：抑制革兰阳性细菌，促进革兰阴性细菌生长，是较好的弱选择性培养基。发酵型革兰阴性杆菌在此平板上菌落颜色不同，便于鉴别菌种。
4、麦康凯平板：为中等强度选择性，抑菌力略强，少数革兰阴性菌不生长。在麦康凯平板上能否生长，是非发酵菌鉴定的一个依据。
5、沙门-志贺琼脂：有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强，影响检出率，使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。
6、碱性琼脂或TCBS琼脂：用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。
7、血液增菌培养基：用于从血液、骨髓中分离常见病原菌。
8、营养肉汤：用于标本及各类细菌的增菌。
如痰标本一般选用血平板、中国蓝/麦康凯、巧克力平板做分离。中国蓝/麦康凯用于筛选革兰阴性杆菌；血平板则用于肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离:而含杆菌肽的巧克力平板则用于筛选嗜血杆菌等。 
