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琼脂糖凝胶电泳

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-04-26
 
  在凝胶电泳中,首先应用的是琼脂电泳,它具有下列优点:(1)琼脂含液体量 大,可达98-99%,近似自由电泳,但是样品的扩散度比自由电泳小,对蛋白质的吸附 极微。(2)琼脂作为支持体有均匀,区带整齐,分辨率高,重复性好等优点。(3) 电泳速度快。(4)透明而不吸收紫外线,可以直接用紫外检测仪作定量测定。(5) 区带易染色,样品易回收,有利于制止备。然而琼脂中有较多硫酸根,电渗作用大。 琼脂糖是从琼脂中提取出来的,是由半乳糖和3.6-脱水-L- 半乳糖相互结合的链状多 糖。含硫酸根比琼脂少,因而分离效果明显提高。   琼脂(糖)电泳常用缓冲液的pH在6-9之间,离子强度为0.02-0.05。离子强度过 高时,会有大量电流通过凝胶,因而产生热量,使凝胶的水份量蒸发,析出盐的结 晶,甚至可使凝胶断裂,电流中断。常用的缓冲液有硼酸盐缓冲液与巴比妥缓冲液。 为了防止电泳时两极缓冲液槽内pH和离子强度的改变,可在每次电泳后合并两极槽内 的缓冲液,混匀后再用。
 
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