指在分离过程中逐渐改变溶剂的组成，使溶剂强度从分离开始到结束逐渐增加；使每个被洗脱的色谱峰在流经全柱时，其容量因子（K）能保持或接近最佳值。在色谱法中，对一组复杂的组分能否得到满意的分离，与选择适当的溶剂洗脱有很大的关系，有时使用单一的溶剂不能达到分离，往往需要采用梯度洗脱才能得到满意的结果。所谓梯度洗脱就是将两种或两种以上不同极性但可以互溶的溶剂，随着时间改变使按一定比例混合，以连续改变冲洗液的极性，使复杂组分得到良好的分离。例如在液相色谱中，梯度淋洗装置有两类：①外梯度淋洗：又称低压梯度淋洗，即将溶剂在常压下，通过程序控制器使溶剂按一定比例混合后再输入高压泵。②内梯度淋洗：又称高压梯度淋洗，这是将溶剂经高压泵加压后再混合的淋洗装置。