一、直接法
1．标本经固定后，PBS洗涤3×3分钟。
2．加荧光素标记的抗体，湿盒内37℃孵育50分钟。
3．PBS洗涤3×3分钟。
4．0.1％伊文氏兰复染。
5．PBS洗3次，蒸馏水洗2次，每次3分钟，以除去NaCl结晶。
6．缓冲甘油封片，镜检。

二、间接法
1．标本固定后，PBS洗涤3×3分钟。
2．滴加一抗，37℃ 40分钟或4℃过夜。
3．PBS洗涤3×3分钟。
4．滴加荧光标记二抗37℃ 40分钟。
5．PBS洗涤3×3分钟。
6．0.1％伊文氏兰复染。
7．PBS洗涤3×3分钟。
8．缓冲甘油封片，镜检。