经HAT选择培养基培养10～14天，未经融合的骨髓瘤细胞相继死去，而杂交瘤细胞即可逐渐长成细胞集落。停用HAT液后，改用HT培养基。当细胞集落面积超过培养孔的1／10以上时，即可用敏感的免疫学方法检测出阳性孔。连续三次检测逐渐升高或维持在同一水平者，则可以做克隆化，一部分则冷藏起来做长期保种用。