本法是以NaIO４先将HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再与Ig上的氨基相结合，所获酶标记抗体的产率高，将近70％的HRP和Ig结合，99％的Ig与酶结合，酶与Ig的活性无重大损失，是目前最常用的方法。

　　1.　原理：经典的过碘酸钠法中需采用二硝基氟苯封闭HRP上残留的α-和ε氨基基以避免酶分子之间的交联。后来Wilson等改用在低PH下使NaIO４氧化HRP，从而省去了二硝基氟苯封闭HRP步骤。HRP经NaIO４氧化后形成的醛化酶可与抗体分子的氨基相连，形成斯夫氏硷，后者可进一步用NaBH４(或乙醇胺)还原生成稳定的酶标记抗体。

　　2.　标记步骤:
　　(1)　称取5mgHRP溶解于1ml蒸馏水中。
　　(2)　于上液中加入0.2ml新配的0.1M NaIO４溶液，室温下避光搅拌20分钟。
　　(3)　将上述溶液装入透析袋中，对1mM PH4.4的醋酸钠缓冲液透析，4℃过夜。
　　(4)　加20μl 0.2M PH9.5碳酸盐缓冲液，使以上醛化桯RP的PH升高到9.0～9.5，然后立即加入10mg IgG(抗体，或SPA5mg)在1ml 0.01M碳酸盐缓冲液中，室温避光轻轻搅拌2小时。
　　(5)　加0.1ml新配的4mg／ml NaBH４液，混匀，再置4℃2小时。
　　(6)　将上述液装入透析袋中，对0.15M PH7.4 PBS透析，4℃过夜。
　　其余步骤(纯化)同戊二醛标记步骤的(6)、(7)、(8)。

　　3.　结果判定：
　　除标记物IgG量的计算，略有不同以外，其余均同戊二醛法。
　　IgG量(mg／ml)＝(OD280nm-OD403nm×0.3)×0.62

　　4.　试剂及器材:
　　(1)　0.1M NaIO４：称取241mg高碘酸钠(广州化学试剂厂，批号830602)溶于蒸馏水10ml中。
　　(2)　1mM PH4.4醋酸钠缓冲液:
　　0.2M NaAc (1.361克／50ml) 3.7ml
　　0.2M HAc (0.601ml／50ml) 6.3ml
　　加蒸馏水至2,000ml。
　　(3)　0.2M PH9.5碳酸盐缓冲液:
　　　　　　　Na２CO３ 0.32克
　　　　　　　NaHCO３ 0.586克
　　　　　　　加蒸馏水至50ml
　　再用蒸馏水作20倍稀释，即成0.01M PH9.5的碳酸盐缓冲液。

　　(4)　NaBH４溶液(4mg／ml):
　　临用时称取NaBH４4mg溶于1ml蒸馏水中。

　　(5)　其它的试剂及器材可参见戊二醛标记法。