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1、不可与大环内脂类抗生素如红霉素、麦迪霉素、螺旋霉素等合用以免降低药效。
2、不可与碱性药物合用。如在含青霉素的溶液中加入氨茶碱、碳酸氢钠或磺胺嘧啶钠等，会使混合液的pH值大于8，青霉素可因此失去活性。
3、青霉素在偏酸性的葡萄糖输液中不稳定，长时间静滴过程中会发生分解，不仅疗效下降，而且更易引起过敏反应。因此青霉素应尽量用生理盐水配制滴注，且滴注时间不可过长。
4、青霉素在干燥状态下较稳定，一旦溶解即不断分解。因此要“现配现用”，不宜溶解后存放，以保证药效，减少致敏物质的产生。
5、每日一次静滴给药方法并不可取。因为当停止滴入后，畜禽体内药物迅速消除，待第二天给药，因间隔时间过长，细菌又大量繁殖。
6、在抢救感染性休克时，不宜与阿拉明或新福林混合静滴。以免使两者效用均降低。
7、不可与维生素C混合静滴。因为维生素C具有较强的还原性，可使青霉素分解破坏，降效或失效。
8、不可与含醇的药物合用，如氢化可的松、氯霉素等均以乙醇为溶媒，而乙醇能使青霉素降效。
9、青霉素与酚妥拉明、去甲肾上腺素、阿托品、扑尔敏、辅酶A、细胞色素C、维生素B6、催产素、利血平、苯妥英钠、氯丙臻、异丙臻等药混合后，可发生沉淀、混浊或变色，应禁忌混合静滴。
